上一篇文章《生化實驗室有哪些建設要求(生化實驗室建設方案)》,我們講到了一般分子生物學實驗室常分為生化實驗室與分子實驗室,分子生物學是從研究生物大分子的結構發(fā)展起來的,現(xiàn)在更多的仍是研究生物大分子的結構與功能的關系、以及調控等方面的機制問題,以生物化學、細胞生物學、遺傳學等學科的知識為基礎。同時也說到了生化實驗室的建設方案,那接下來今天就要說說分子生物實驗室建設方案。
分子生物實驗室建設方案
分子生物研究和實驗的常規(guī)方法,并沒有嚴格的凈化要求,但是為了避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排式氣流組織形式。同時控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
試劑貯存和準備區(qū):主要是作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備,試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料需貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。對氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。
標本制備區(qū):作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時DNA的合成。其壓力梯度要求為相對于臨近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)域進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區(qū)域內不必要的走動。
擴增反應混合物配制和擴增區(qū):主要是DNA擴增,已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應混合液,制備成反應混合液等,也可以在本區(qū)域內進行。在PCR測定中,通常在擴增后須打開反應管。因此擴增有較高的污染危險性,因此本區(qū)的壓力梯度要求為,相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)域漏出。
擴增產(chǎn)物分析區(qū):主要進行的操作為擴增片段的測定,如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區(qū)域可不設。應注意擴增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為,相對于臨近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)域擴散至其它區(qū)域。
實驗室配套設施:是保證實驗工作的必要條件,根據(jù)各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、生物柜、離心機、加樣器等。
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